Лаборатория морфологии и электронной микроскопии

Сотрудники лаборатории

• Томилин Н.В., к.б.н., ведущий научный сотрудник
• Гайкова О.Н., д.м.н., профессор, ведущий научный сотрудник
• Забродская Ю.М., д.м.н., ведущий научный сотрудник
• Харченко Т.В., к.б.н., ведущий научный сотрудник
• Филько О.А., к.б.н., старший научный сотрудник
• Храброва А.В., к.б.н., старший научный сотрудник
• Соловьева Н.Е., к.б.н., научный сотрудник
• Схаляхо Р.А., к.б.н., научный сотрудник
• Дьякова А.В., научный сотрудник
• Беляева М.М., младший научный сотрудник
• Литовченко А.В., младший научный сотрудник
• Бебко В.В., младший научный сотрудник
• Литвин Я.А., лаборант-исследователь
• Жиганова Л.Ю., лаборант-препаратор

Исследование механизмов токсического и иммунотоксического действия ксенобиотиков цитогенетическими и патоморфологическими методами, производится определение стабильности геномов животных и человека, определение уровня синтеза специфических белков в тканях при острых и хронических интоксикациях.

Основные компетенции

• установление механизмов токсического действия химических веществ и лекарственных препаратов морфологическими методами;
• установление механизмов токсического и иммунотоксического действия ксенобиотиков цитогенетическими методами: оценки стабильности геномов животных и человека с помощью метода щелочного гель-электрофореза (метод ДНК-комет), микроядерного теста на ретикулоцитах периферической крови, микроядерного теста и метода хромосомных аберраций на клетках костного мозга, микроядерного теста на культуре лимфоцитов животных и человека, а также с использованием методов конфокальной микроскопии и проточной цитофлурометрии;
• установление роли различных типов гибели клетки (некроза, апоптоза и аутофагии) в патогенезе химических интоксикаций.

Проводимые исследования

• оценка общетоксического действия в доклинических испытаниях фармакологических препаратов патоморфологическими методами;
• доклинические исследования потенциального мутагенного действия лекарственных средств с помощью метода щелочного гель-электрофореза и метода учета хромосомных аберраций на клетках костного мозга грызунов;
• доклинические исследования канцерогенного действия лекарственных средств с помощью батареи краткосрочных тестов, включающей метод оценки хромосомных аберраций и полиорганный метод щелочного гель-электрофореза единичных клеток;
• биомниторинг состояния генома людей, контактирующих с химическими факторами в процессе трудовой деятельности или проживающих на территориях с неблагополучной экологией, с помощью микроядерного теста и щелочного гель-электрофореза на клетках периферической крови;
• оценка острой токсичности медицинских изделий, почв, отходов, спиртов, водок и слабоалкогольных напитков с использованием альтернативных тест-объектов - спермы крупного рогатого скота и зеленых водорослей Scenedesmus qaudricauda.

Возможности лаборатории

• морфологические исследования механизмов токсического действия химических веществ и лекарственных препаратов;
• исследование механизмов токсического и иммунотоксического действия ксенобиотиков цитогенетическими методами: оценка стабильности геномов животных и человека с помощью метода щелочного гель-электрофореза (метод ДНК-комет), микроядерного теста на ретикулоцитах периферической крови, микроядерного теста и метода хромосомных аберраций на клетках костного мозга, микроядерного теста на культуре лимфоцитов животных и человека, а также с использованием методов конфокальной микроскопии и проточной цитофлурометрии;
• исследование роли различных типов гибели клетки (некроза, апоптоза и аутофагии) в патогенезе химических интоксикаций;
• патоморфологические исследования при оценке общетоксического действия в доклинических испытаниях фармакологических препаратов;
• доклинические исследования потенциального мутагенного действия лекарственных средств с помощью метода щелочного гель-электрофореза и метода учета хромосомных аберраций на клетках костного мозга грызунов;
• доклинические исследования канцерогенного действия лекарственных средств с помощью батареи краткосрочных тестов, включающей метод оценки хромосомных аберраций и полиорганный метод щелочного гель-электрофореза единичных клеток;
• биомниторинг состояния генома людей, контактирующих с химическими факторами в процессе трудовой деятельности или проживающих на территориях с неблагополучной экологией, с помощью микроядерного теста и щелочного гель-электрофореза на клетках периферической крови;
• использование альтернативных методов оценки острой токсичности медицинских изделий, почв, отходов, спиртов, водок и слабоалкогольных напитков с использованием в качестве тест-объекта сперму крупного рогатого скота и зеленые водоросли Scenedesmus qaudricauda.

Определение уровня синтеза специфических белков в тканях и гомогенатах тканей:

• определение уровня экспрессии конкретных белков, участвующих в различных внутриклеточных механизмах, белков апоптоза (программированной клеточной гибели);
• идентификация клеток различных типов по их уникальным маркерным признакам;
• изучение синтетических и секреторных процессов;
• выявление гормонов и рецепторов к ним.

Иммуногистохимические реакции на тканях с последующей световой или конфокальной микроскопией (метод иммуногистохимия), метод оценки – денситометрия.
Иммунное определение уровня экспрессии белков в гомогенатах тканей или в жидкостных средах (метод Western blotting).

Определение уровня апоптоза (программированной клеточной гибели) в норме и при различных воздействиях (метод TUNEL).

Оценка цитотоксического и генотоксического действия ксенобиотиков и токсикантов.

• Морфология и гистохимия (окраска гематоксилином и эозином, по методу Ниссля, Шпильмеера и т.д., морфометрия).
• Электронная микроскопия.
• Определение содержания воды и электролитов в тканях.
• Полиорганный щелочной гель-электрофорез (метод ДНК-комет) клеток крови, костного мозга, печени, селезенки, центральной нервной системы, эпителиальных клеток различных отделов желудочно-кишечного, мочевого пузыря белых крыс, в случае ядерных клеток крови, на крови человека.
• Учет хромосомных аберраций в клетках костного мозга белых крыс (окраска по Гимза).
• Микроядерный тест на полихроматофильных эритроцитах костного мозга белых крыс, на ретикулоцитах периферической крови человека и крыс.
• Экспресс-оценка острой токсичности методом in vitro с использованием спермы быка в качестве клеточного тест-объекта.
• Оценка цитотоксического действия ксенобиотиков с помощью трипанового синего; по относительному содержанию ретикулоцитов в крови и политохроматофильных эритроцитов в клетках костного мозга или ретикулоцитов в крови; метода двойной окраски с помощью флуоресцентных красителей: бромистого этидия и акридинового оранжевого; по относительному содержанию двуядерных клеток в культуре лимфоцитов с цитокинетическим блоком и диффузного метода для полиорганного метода ДНК-комет.
• Конфокальная микроскопия.

Комплексы оборудования

1. Гистологических исследований.
2. Ультраструктурных исследований.
3. Исследования генотоксичности.
4. Исследования острой токсичности альтернативными методами.

Приборное оснащение

1. Гистологический комплекс Tissue Tek.
2. Микроскопы:
   • Nikon Eclipse 80i, Nikon Eclipse 50i, Nikon Eclipse Сi-S, Leica DM1000
   • Cанный микротом PFM
   • Электронный микроскоп JEM 100B
   • Ультрамикротом Ultratom 5

Учебники

1. Бажанова Е.Д., Д.Л. Теплый. Физиология старения. Старение и апоптоз. Глава 21, с. 319-329, Учебник под ред. Д.Л. Теплого «Физиология человека и животных», АГУ, изд. дом «Астраханский университет», 2017, 335 с. ISBN 978-5-9926-0924-0